Bu tampon DNT hərəkatını öyrənmək üçün istifadə olunur
Bu tamponda aşağı ion qüvvəsi və aşağı tamponlama qabiliyyəti var. Böyük (> 20 kb) DNT-nin elektroforez elektroforezinə ən uyğun və tez-tez dəyişdirilməlidir və ya daha uzun (> 4 saat) gel dövrlərinə çevrilməlidir.
Bununla yanaşı, buferin bir neçə partiyasını nəzərdən keçirmək isteyebilirsiniz.
Tamponun asanlaşdırılması və addımların tez bir şəkildə həyata keçiriləcəyini nəzərə alsaq, bir anda birdən çox partiyanı çəkmək xüsusilə vaxt çəkən və çəkilmək çətin olmamalıdır. Aşağıdakı təlimatları istifadə edərək, TAE buferini etmək üçün yalnız 30 dəqiqə çəkməlidir. İşdə necə:
EDTA'nın Fond Çözümünü Hazırlayın
EDTA (etilendiamin tetraasetik turşusu) həlli əvvəlcədən hazırlanır. PH 8.0 qədər düzəldilməyənədək EDTA tamamilə həll olunmayacaq. 0.5 M EDTA 500 ml'lik bir stock həlli üçün 93.05 qram EDTA disodyum tuzu (FW = 372.2) çəkin. 400 mililitr deionlaşdırılmış suda həll olunmalı və pH'yi sodyum hidroksit (NaOH) ilə tənzimləyin. Solüsyonu son 500 millilitr həcmdə toplayın.
TAE bir Fond Çözüm Up Whip
242 qram Tris bazası (FW = 121,14) çəkərək və təxminən 750 mililitr deionlaşdırılmış suda həll edilərək, TAE-nin konsentrasiyalı (50x)
Diqqətlə 57.1 mililitr buzlaq turşusu və 0.5 M EDTA 100 pillə (pH 8.0) əlavə edin. Bundan sonra, həllini son həcmdə 1 litrə qədər tənzimləyin. Bu səhmdar həll oda temperaturunda saxlanıla bilər. Bu tamponun pH düzəldilmir və təxminən 8.5 olmalıdır.
TAE-nin bir iş həllini hazırlayın
1x TAE tamponunun işçi həlli sadəcə səhmdar həllini 50x deionlaşdırılmış suda seyreltməklə həyata keçirilir.
Son solut konsentrasiyaları 40 mM təşkil edir. Tris-asetat və 1 mM EDTA. Tampon artıq agaroz jelində istifadə etmək üçün hazırdır.
Bufer üçün nə lazımdır
TAE tamponunu yaratmaqdan sonra yalnız tez və sadə bir sıra təlimat tələb olunur, bunun üçün lazım olan materialların sayı həddindən artıq deyil. EDTA disodium tuzu, Tris bazası və buzlu sirkə turşusu lazımdır.
Tamponunun hazırlanması, həmçinin uyğun bir pH metri və kalibrləmə standartları tələb edir. Ayrıca, 600 mililitr və 1500 millilitr baqqal və ya şüşə və silindrlərin məzmunu lazımdır. Nəhayət, deionlaşdırılmış suya, çubuqları qarışdırmaq və plitələrə qarışdırmaq lazımdır.
Wrapping Up
Məktəbin saytında, iş yerində və ya evinizdə olduğu kimi başqa yerlərdə buferi necə qurmaq planlaşdırırsınız? TAE tamponu üçün yuxarıda göstərilən materialların hamısına sahib olduğunuzdan əmin olmaq üçün inventarın yoxlanılması.
Əgər materiallar üçün ödəniş etməməyi xahiş etsəniz, evinizin xaricindəki tamponları tövsiyə etmək tövsiyə olunur. İnternetə ehtiyac duyduğunuz materialları asanlıqla sifariş edə və ya onlar üçün xüsusi bir mağazaya müraciət edə bilərsiniz.