Bu tamponlar yaxın neytral pH-da bioloji tətbiqlər üçün istifadə edilə bilər
Fosfor turşusu üçün üç pKa dəyərləri (ÇXK Kimya və Fizika Elmi Kitabından) 2,16, 7,21 və 12,32 təşkil edir. Monosodyum fosfat və onun birləşdiyi baza, disodium fosfat, burada göstərildiyi kimi, bioloji tətbiqlər üçün 7 ətrafında pH dəyərinin tamponları yaratmaq üçün istifadə olunur.
Bu tamponun hazırlanması, TAE və TBE tamponlarından daha çətindir. Bununla belə, çox çətin deyil. Yalnız orta hesabla. Bu tamponu qamçılamaq üçün təxminən 10 dəqiqə çəkməlidir. İşdə necə.
1. Tampon xüsusiyyətlərinə qərar verin
Bir tampon hazırlamadan əvvəl, ilk növbədə hansı molaritənin olmasını istədiyini, nə həcmdə və istədiyiniz pH nə olduğunu bilməli. Ən tamponları 0.1 M və 10 M arasındakı konsentrasiyalarda ən yaxşı işləyir. PH kisəsi / birləşən pKa pH birimində olmalıdır. Sadəlik üçün bu nümunə hesablanması 1 litr tampon üçün olacaq.
2. Asidin nisbəti Asliyə təyin edin
Xenderson-Hasselbalch tənliyi istifadə edin (aşağıda) istənilən pH bir tampon etmək üçün asit bazına nisbəti müəyyən etmək üçün. Istədiyiniz pH-yə yaxın pKa dəyərini istifadə edin və nisbət pKa-ya uyğun olan turşun-bazlı birləşmə cütünə aiddir.
HH tənliyi: pH = pKa + log ([Base] / [Asid])
PH 6.9 bir tampon üçün, [Base] / [Acid] = 0.4898
[Acid] üçün əvəz et və [Base]
Tamponun istənilən molariti [Acid] + [Base] məbləğidir.
1 M tampon üçün [Base] + [Acid] = 1 və [Base] = 1 - [Acid]
Bunu nisbət tənliyi ilə əvəz edərək, 2 addımdan əldə edirsiniz:
[Acid] = 0.6712 mol / L
Çıxın [Acid]
Tənzimləmə: [Base] = 1 - [Acid] istifadə edərək, hesablaya bilərsiniz:
[Base] = 0.3288 mol / L
3. Asid və Konjugat bazasını qarışdırın
Henderson-Hasselbalch tənzimlənməsini istifadə etdikdən sonra, tampon üçün kisənin asılılığının nə dərəcədə tələb olunduğunu hesablamaq üçün monosodyum fosfat və disodium fosfatın düzgün miqdarlarını istifadə edərək, 1 litr həll altında hazırlayın.
4. pH-ni yoxlayın
Tampon üçün doğru pH-ə çatıldığını təsdiqləmək üçün bir pH probu istifadə edin. Fosforik turşusu və ya sodyum hidroksidi (NaOH) istifadə edərək, lazım gəldikdə bir qədər tənzimləyin.
5. Həcmi düzəldin
İstənilən pH əldə edildikdən sonra, tampon həcmini 1 litrə çatdırın. Daha sonra istədiyi kimi tamponu süzün. Bu tampon 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M və ya arasında bir şey yaratmaq üçün seyreltilebilir.
6. Tampon üçün məsləhətlər
Pkanın asanlıqla tam olaraq ölçülməyini unutmayın. Müxtəlif mənbələrdən ədəbiyyatda bir az fərqli dəyərlər mövcud ola bilər.
7. Sənə nə lazımdır?
Tampon etmək üçün, qalan maddələr avadanlıq olduqda, üç maddə lazımdır. Maddələr pH dərəcəsini tənzimləmək üçün monosodyumlu fosfat, disodyum fosfat və fosfor turşusu və ya sodyum hidroksiddir.
Ayrıca bir pH metr və prob və uyğun laboratoriyaya ehtiyacınız olacaq. Bu həcmli bir şüşə, məzmunlu silindrlər, baqqal və çubuqlar daxildir.
Nəhayət, bir qarışdırıcı qızdırıcı lazımdır.