RFLP Analizi olaraq da adlandırılan texnika fərdi insanların genetik kodlarında polimorfizmlərdən istifadə edir. Bir növün bütün üzvləri əsasən eyni genetik tərkibə malik olmasına baxmayaraq, bu kiçik fərqlər fərdlər arasında görünüş və ya maddələr mübadiləsi kimi fenotipin dəyişmələrinə əsaslanır.
RFLP: Analiz üsulu və tətbiqi
RFLP təhlili üsulu məhdudlaşdırma fermentləri ilə DNA fragmentlərini agaroz jel elektroforez ilə ayırmaq və parçaların sayını və nisbi ölçülərini müəyyənləşdirməklə müəyyən dəyişkənliyi olan DNT-nin müəyyən bir bölgəsini kəsməkdən ibarətdir.
Bir məhdudlaşdırma fermenti bir fermentdir, məhdudlaşdırma sahələrində DNT-ni kəsən bir protein molekuludur. Əslində, DNT nümunəsi parçalanır və məhdudlaşdırma fermentləri tərəfindən sindirilir. Nəticədə parçalanmalar uzunluqlarına görə ayrılır və hər bir fərd üçün sınaqdan keçirilmiş parçaların ölçüləri fərqlənir.
Tam RFLP prosesi prob etiketi, DNT parçalanması, elektroforez, blotting, hibridizasiya, yuyulma və autoradioqrafiya tələb edir. Təsbit edilən RFLP, birbaşa otoradyografide X-ray filmi istifadə edərək görüntülenir, burada DNA fragmanları elektroforez ile birbirinden ayrıldıktan sonra incelenerek analiz edilir.
RFLP təhlili üçün müraciətlərin bəziləri aşağıdakılardır:
- DNT barmaq izi . Məhkəmə alimləri Cinayət səhnələrində toplanan sübut nümunələri əsasında şübhəlilərin müəyyən edilməsi üçün RFLP analizindən istifadə edə bilərlər.
- Paternlik. RFLP də atalıq müəyyənləşdirilməsi və ya atalarının izlənməsi üçün istifadə olunur.
- Genetik müxtəliflik. Bu texnika heyvanların təkamül və miqrasiyası, heyvan əhalisinin heyvandarlıq nümunələrini öyrənməkdə və bəzi xəstəliklərin aşkarlanmasında və tanıdılmasında öyrənilə bilər.
Genomlarda dəyişikliklərin aşkar edilməsi RFLP istifadə üsulu genetik xəritələr və genetik xəstəlik analizində mühüm vasitədir. Müəyyən bir xəstəlik geninin yeri müəyyən bir xromosomda axtarılırsa, araşdırmaçılar bir ailənin üzvlərinin DNT'ini xəstəliyi ilə analiz edərlər, sonra RFLP allellərində mirasın oxşar nümunələrini axtararlar.
Bir xəstəlik geninin lokallaşdırıldıqdan sonra, digər ailə üzvləri ilə bağlı RFLP analizinin aparılması mutant genlərin daşıyıcısını aşkarlaya bilər və ya ümumi xəstəlik riskini siqarlaya bilər. RFLP texnikasının adi elmdə və bir sıra digər sahələrdə DNT analizi üçün daha yeni, daha möhkəm texnika istifadə edildiyini qeyd etmək vacibdir.
Təhlilin mənfi aspekti
Təəssüf ki, RFLP analizi texnika zəif və yavaş. Böyük miqdarda nümunə DNT tələb etməklə yanaşı, nümunə, ümumiyyətlə, DNT nümunələri üçün nisbətən böyük olan dörddə birinin ölçüsü olmalıdır - proqnozlaşdırma prosesindən yuyulma və otoradioqrafiya prosesindən, tam ay başa çatdırmaq üçün.
İnsan Genomu Layihəsi nəticələri RFLP ehtiyacını olduqca əvəz etdi. Layihə, insan hüceyrələri, insan genomu və insan genomunun bütün genlərini müəyyənləşdirmək üçün DNT-nin bütün ardıcıllığını təyin etməyə imkan verdi.